Thiamine HCl
C12H17CIN4OS HCl
۱۰
۶-۳ گندزدایی و سترون سازی وسایل
به منظور کار در اتاق انتقال باید وسایل از جمله پتری دیش، لوله های آزمایش، پنس، تیغ های جراحی و دسته تیغ[۲۰۰] و شیشه های آب کشت کاملا استریل شده باشند. چون در تماس مستقیم با ریزنمونه و بافت های موجود در محیط کشت بافت قرار می گیرند و در صورت آلوده بودن سبب بروز آلودگی می شوند. وسایل را باید در اتوکلاو در دمای ۵/۱۲۱+ درجه سانتیگراد و فشار ۱ اتمسفر به مدت ۲۰ دقیقه استریل کرده و سپس به اتاق انتقال، منتقل شوند.
۷-۳ آزمایش اول: گندزدایی سطحی بذر
این عمل گندزدایی سطحی[۲۰۱] نامیده می شود چون آلوده کننده ها را از سطح بذر از بین می برد. برای از بین بردن آلودگی سطحی از موادی شامل الکل اتیلیک ۷۰ درصد و هیپوکلریت سدیم (محتوی ۲۵/۵ درصد کلر فعال[۲۰۲]) استفاده گردید. سپس بذور با آب مقطر استریل شده به مدت ۴ تا ۵ دقیقه شست و شو و این مرحله ۳ بار تکرار شد. به منظور بدست آوردن بهترین دستورالعمل گندزدایی بذر، آزمایشی در قالب طرح کاملا تصادفی با ۱۲ تیمار در ۳ تکرار و هر تکرار شامل ۱۰ شیشه انجام شد. تیمارها در جدول ۳-۳ نشان داده شده است.
جدول ۳-۳ تیمارهای گندزدایی جهت ضدعفونی بذر
تیمار ۱
شاهد (بدون استفاده از الکل اتیلیک و هیپوکلریت سدیم)
تیمار ۷
الکل اتیلیک ۷۰ درصد به مدت ۳۰ ثانیه
تیمار ۲
هیپوکلریت سدیم ۱۰ درصد به مدت ۱۰ دقیقه
تیمار ۸
الکل اتیلیک ۷۰ درصد به مدت ۳۰ ثانیه + هیپوکلریت سدیم ۱۰ درصد به مدت ۱۰ دقیقه
تیمار ۳
هیپوکلریت سدیم ۱۰ درصد به مدت ۱۲ دقیقه
تیمار ۹
الکل اتیلیک ۷۰ درصد به مدت ۳۰ ثانیه + هیپوکلریت سدیم ۱۰ درصد به مدت ۱۲ دقیقه
تیمار ۴
الکل اتیلیک ۷۰ درصد به مدت ۲۰ ثانیه
تیمار ۱۰
الکل اتیلیک ۷۰ درصد به مدت ۴۵ ثانیه
تیمار ۵
الکل اتیلیک ۷۰ درصد به مدت ۲۰ ثانیه + هیپوکلریت سدیم ۱۰ درصد به مدت ۱۰ دقیقه
تیمار ۱۱
الکل اتیلیک ۷۰ درصد به مدت ۴۵ ثانیه + هیپوکلریت سدیم ۱۰ درصد به مدت ۱۰ دقیقه
تیمار ۶
الکل اتیلیک ۷۰ درصد به مدت ۲۰ ثانیه + هیپوکلریت سدیم ۱۰ درصد به مدت ۱۲ دقیقه
تیمار ۱۲
الکل اتیلیک ۷۰ درصد به مدت ۴۵ ثانیه + هیپوکلریت سدیم ۱۰ درصد به مدت ۱۲ دقیقه
برای محاسبه درصد آلودگی بعد از ۱۰ روز تعداد شیشه های آلوده بر کل شیشه ها تقسیم شده و در ۱۰۰ ضرب شد.
